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技術文章

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  • 201710-20
    動脈粥樣硬化研究動物實驗

    動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是冠心病、腦梗死、外周血管病的主要原因。脂質代謝障礙為動脈粥樣硬化的病變基礎,其特點是受累動脈病變從內膜開始,一般先有脂質和復合糖類積聚、出血及血栓形成,進而纖維組織增生及鈣質沉著,并有動脈中層的逐漸蛻變和鈣化,導致動脈壁增厚變硬、血管腔狹窄。病變常累及大中肌性動脈,一旦發展到足以阻塞動脈腔,則該動脈所供應的組織或器官將缺血或壞死。由于在動脈內膜積聚的脂質外觀呈黃色粥樣,因此稱為動脈粥樣硬化。動脈粥樣硬化模型,模型構建方式常...

  • 201710-13
    科研中的miRNA研究方法總結

    科研中的miRNA研究方法總結microRNA(miRNA)是一類長度在22nt左右的內源非編碼小RNA,廣泛存在于動物、植物、病毒等多種有機體中。1993年,Lee等人在秀麗新小桿線蟲(C.elegans)中發現了控制著線蟲時序性發育的lin-4。2000年,Reinhart等發現了另一個具有轉錄后調節功能的小分子RNA:let-7。隨后的幾年時間里,許多研究人員相繼發現了這類RNA,并將這些具有時空表達特異性的非編碼小分子RNA命名為microRNA(miRNA)。從長的...

  • 201710-13
    RACE技術的原理和操作

    近年來隨著生物技術的不斷發展,出現了許多克隆新基因的方法和手段,如圖譜克隆技術、轉座子標簽技術、mRNA差異顯示技術二基因組減法技術以及cDNA文庫篩選技術等。但上述方法人多具有實驗周期長、技術步驟煩瑣且工作量大等特點。cDNA末端快速擴增技術(rapidamplificationofcDNAends,RACE)是一種基于PCR從低豐度的轉錄本中快速擴增cDNA的5'和3'末端的有效方法,以其簡單、快速、廉價等優勢而受到越來越多的重視.經典的RACE技術是由Frohman等(...

  • 20179-28
    實驗助手——質粒圖譜如何“瞅”

    每當拿到一個質粒圖譜,是不是一下就有點懵了?這些ori、RBS、tet是什么?這些箭頭代表什么,轉錄的方向嗎?不要著急,申知心生物把這些告訴你,也許會解決你的困惑。質粒和載體傻傻分不清楚質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主復制的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質粒雖然都是環狀構型。載體即要把一個有用的基因(目的基因——研究或應用基因)通過基因工程手段送到生物細胞(受體細胞),需要運載工具(交通工具)攜帶外源基因進...

  • 20179-26
    實驗助手—六大要素讓你告別RNA反轉錄失敗

    RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類:oligodT,隨機引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應用范圍更加廣泛,是因為可由此獲得mRNA的全長拷貝。然而如果mRNA長度過長4kb,或者沒有polyA尾(原核mRNA或rRNA),就需要考慮使用隨機引物進行RNA的反轉錄。隨機引物雖能長基因的5’末端的轉錄,但并不能獲得整個基因全長的cDNAs,且對RNA樣品質量要求比較高,此時可用6-8個核酸聚合體來提高cDNAs的合成量。而對于真核生物的qPCR...

  • 20179-21
    解析幾個常見Elisa試劑盒使用過程中的困惑

    對于Elisa試劑盒的使用,總有解不完的疑問,比如說加樣器不確;特別10ul以下的加樣器,對成果影響;保溫設備不良;洗刷用水不規范。如何解決這些疑問呢:1、加樣不;沒有混勻。加樣時必定要細心。加樣后,再查看,以防漏加、錯加。2、加樣后,重復抽吸3次混勻,防止血清集合孔底,致使非特異性吸附。洗刷洗刷不①每次灌水洗刷,應停止30秒鐘;②選用吸水紙作為襯墊,每次洗刷后扣干孔內水分;3、可選用塑料洗刷瓶。加酶反響漏加滴加后,細心查看各孔成果判別①包含陰性對照孔在內,各孔顯色普遍偏深;...

  • 20179-21
    科研有六重境界,你到第幾重了?

    臨淵羨魚階組里的前輩們看起來個個都是牛人,各有各的事業,可是喂~誰來提挈小生則個!導師:“在咱們這個組的大框架下自己找個坑填上去~”——坑在哪?師姐:“問我問題之前不能先自己查一下嘛?你這個問題明明有現成答案呀~”——上哪查師兄:“去去去,小孩子一邊看文獻去!”——看不懂~_看什么文獻,怎么看?專業術語不懂怎么辦?好吧,大不了啃字典,先把組里發過的文章都過一遍好了。終于有一天組會討論時,哇我居然聽懂了躍躍欲試階已經能相當熟練地在知網、NCBI等數據庫上查到自己想要的信息了,儀...

  • 20179-18
    內外科大夫那些有趣的區別

    雖然說內科和外科都是相親相愛的一家人,但是細數一下,兩者之間還是有一些有趣的差別,看看網友們是如何總結的。區別一:內科大夫多話癆皇上:此番遼國起傾國之力,那蕭皇后親率三十萬大軍南下,諸位愛卿如何是好?內科大臣:啟稟皇上,臣以為還當細細打探方能定奪,不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征,還是南院大王統帥?又或者是其他將領?這分型應當明確。三十萬兵力應當有所鑒別,據臣所知遼國連續三年大旱,北方更有金人犯境,能聚三十萬兵力實在存疑,打個問號。遼國大軍南下,是分兵幾路?每路兵馬幾何?還需完...

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