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Product Center上海申知心致力于臨床前藥效學CRO實驗,多年的藥效學陰虛動風模型的構建,為廣大藥效學實驗提供保障。可開展大小鼠藥效學陰虛動風模型的構建。
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建模方法:
3﹪Pelltobarbitalum Natricum 50 mg/kg腹腔注射麻醉。然后將大鼠固定于腦立體定位儀上,頭部去毛,常規消毒。無菌條件下,沿正中線切開大鼠顱頂皮膚,剝離骨膜,暴露前囟。以前囟為準,根據包新民[10]等著大鼠腦立體定位圖譜,確定右側黑質二坐標:
①前囟后5.2 mm,正中線右側1.0 mm,硬膜下9.0 mm。
②前囟后5.2 mm,正中線右側2.5 mm,硬膜下8.5 mm。
手術要求部位小心鉆開顱骨,用5 μL微量進樣器將6-OHDA(溶于含0.2﹪維C的生理鹽水中,即秤量藥品抗壞血酸0.001 g,溶于生理鹽水0.5 mL中)注入右側黑質部(以1.0 mm/min速度緩慢進針),每孔3 μL,注射速度為1 μL/min,注射完畢后留針5 min,然后以1.0 mm/min速度緩慢退針。手術完成后,用醫用明膠海綿填塞顱骨孔,縫合切口皮膚,肌肉注射霉素7天,待動物清醒后放回飼養籠中飼養。假手術組只注射0.2﹪維C的生理鹽水,正常對照組只捆綁動物,不作任何處理。10 d后,以腹腔注射APO 0.5 mg/kg誘發大鼠向一側旋轉,記錄開始旋轉至30 min內的旋轉圈數,以旋轉圈數平均>7次/min者為合格的PD模型。
將成功PD模型大鼠給予腹腔注射L-dopa + 芐絲肼(50 mg/kg L-dopa和12.5 mg/kg芐絲肼,即L-dopa和芐絲肼溶于含0.05%的乙醇和0.1﹪的抗壞血酸的注射用水中,配成10 mg/mL),每日兩次,連續2周。正常對照組、假手術組給予腹腔注射等量的含0.05%的乙醇和0.1%的抗壞血酸的注射用水,每日兩次,連續2周。2周后誘發動物,具有典型AIM(AIM評分大于20分)表現,且APO誘導大鼠對側旋轉圈數增加者,為陰虛動風證LID模型。
分子實驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術、分子克隆與質粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。
基因組學平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實驗。
蛋白組學平臺:能實現LC-MS、ITRAQ、蛋白質修飾分析等重點實驗項目。
病理學平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學染色、HE染色、特殊染色等實驗。
臨床前CRO服務:主要提供呼吸系統、神經系統、免疫系統性疾病的藥效學評價服務,包括靶點驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價、藥代
動力學和藥理學研究以及院內制劑研發等。
項目轉化服務:助力客戶進行方案設計、聯合課題申報、藥物項目引進和孵化,解決客戶對實驗技術平臺、專業人和融資的需求。