技術文章
Technical articles(1)復制方法 體重1.5kg左右的雌性新西蘭兔,經耳緣靜脈按8.0×10的-2次方g/kg體重的劑量一次性注射環磷酰胺溶液,6h后,用0.1%苯扎溴銨(新潔爾滅)消毒兔陰丨門附近皮膚,無菌條件下行膀胱導尿插管,用注射器吸盡尿液,抽取含1000000個/ml大腸桿菌的培養液1ml,經導尿管注入膀胱內,拔出插管。動物自由飲水和進食,24h后,觀察動物排尿頻率,記錄12h內的排尿次數;同時采血作血涂片,鏡下觀察和計數白細胞。經耳緣靜脈注射空氣處死實驗兔,手術剖開腹腔與盆腔,暴露膀胱,無菌條件下抽取尿液,取尿液一滴在倒置顯微鏡下觀察尿沉渣;解剖膀胱,取兩輸尿管口之間的膀胱壁全層組織,置于10%甲醛中固定,作常規組織切片,HE染色,顯微鏡下觀察。
(2)模型特點 本模型形成膀胱炎的過程中,環磷酰胺起先導作用。由于環磷酰胺可引起機體神經生長因子在神經軸突上的逆行轉運,導致膀胱功能發生改變及產生炎癥。而大腸桿菌的感染,對于模型動物膀胱炎的形成則起著十分重要的作用;大腸桿菌papG等位基因的異常,可誘發兔急性膀胱炎階段的病變。注射大腸桿菌培養液24h后,模型動物的排尿頻率明顯增加,血涂片鏡下觀察白細胞分化良好,未見有白細胞明顯減少或大量增殖現象。肉眼及鏡下觀察模型動物尿液呈黃色,呈明顯混濁狀,鏡下尿液中見紅細胞70~80個/HP,中性粒細胞2~3個/HP,上皮細胞2~3個/HP,并可見大量細胞裂解物。鏡下病理觀察顯示,膀胱黏膜明顯損傷,連續性破壞,與黏膜下層脫落,膀胱組織內可見廣泛性出血和充血。本模型制作方法簡單,操作方便,耗費低廉,模型病理表現穩定。
(3)比較醫學 急性膀胱炎為臨床上人類常見的下尿路感染性疾病,患病后其臨床表現復雜多樣,除尿頻、尿急、尿痛外,還有膀胱燒灼感、排空后滴瀝、下腹或下背部疼痛、會陰丨部持續性疼痛或擠壓感、全身不適等。如不能及時和有效地治療,則可能導致患者逆行性感染的加劇,并出現其他并發癥。對急性膀胱炎的臨床治療,目前方法較多,效果較好。但近年來由于細菌耐藥性的出現,該病患病率有增高的趨勢。因此,建立理想地急性膀胱炎動物模型,具有較好地比較醫學意義。本模型采用耳緣靜脈注射和膀胱插管的方法,分別將環磷酰胺和大腸桿菌導入模型兔體內,造成了動物出現尿頻、尿成分異常、膀胱黏膜損傷、間質廣泛出血與充血等病理表現,建立了與臨床疾病表現相似的急性膀胱炎動物模型,模型可用于尿路逆行性感染藥物治療和藥物篩選方面的研究。